Caractérisation et modification des anticorps
Chez RD-Biotech, nous sommes experts dans la production d’anticorps recombinants de haute qualité et de très faible teneur en endotoxines. Grâce à notre plateforme d’expression optimisée sur cellules CHO ou HEK, nous pouvons générer, à partir de vos séquences d’intérêts, de quelques mg à plusieurs grammes d’une large gamme de format d’anticorps, avec des délais de livraison pouvant aller jusqu’à quatre semaines avec notre offre de production Fast-Track.
Elle repose sur l’introduction d’un vecteur d’expression codant pour les chaînes lourde et légère dans une lignée cellulaire permettant une expression rapide et à court terme des anticorps recombinants, idéale pour le criblage de candidats ou la production en petite à moyenne échelle.
Caractérisation des anticorps
Nous proposons un large panel de contrôles pour évaluer les propriétés et performances vos anticorps et garantir la pureté, efficacité, spécificité, stabilité du produit fini
- Dosage des protéines totales par spectrophotométrie ou kits de dosage protéique (ex BCA)
- SDS-PAGE (conditions réductrices et non réductrices) et Western Blot
- Capillary Electrophoresis (CE-SDS)
- Spectrométrie de masse pour confirmer la masse moléculaire, identifier des modifications post-traductionnelles et analyser l’hétérogénéité.
- Contrôle de pureté par SEC analytique (Dégradations / Agrégations)
- Séquençage des anticorps
- Evaluation de la spécificité et de l’affinité des anticorps par ELISA, Western Blot, Octet, Cytométrie, bio-essais à façon, etc.
- Essais de stress thermique
- Tests de stockage à long terme
- Détermination du taux d’endotoxines bactériennes par test LAL
- Vérification de l’absence de contamination bactérienne et fongique
- Détermination du taux résiduel de contaminants de Protéine A (Kit RD-Biotech FastELISA) (lien)
- Dosage des contaminants d’Ig bovines (kit RD-Biotech FastELISA)
Polishing des anticorps
Vous souhaitez obtenir un anticorps exempt d’agrégats et de fragments résiduels ? Bien que la majorité des productions atteignent une pureté supérieure à 95% dès l’étape de purification, certains anticorps peuvent nécessiter une étape supplémentaire de polissage pour éliminer les impuretés restantes.
La pureté de l’anticorps peut ainsi être améliorée par différentes méthodes, notamment :
- chromatographie d’exclusion par taille (SEC) préparative ;
- chromatographie par échange d’ions (IEC)
- ou d’autres techniques adaptées aux spécificités de votre produit final
Couplage des anticorps
RD-Biotech propose un service de couplage d’anticorps avec un large panel de marqueurs, pour une utilisation adaptée à vos applications analytiques et diagnostiques.
Les anticorps peuvent notamment être marqués avec :
- la Peroxydase de Raifort (HRP)
- la Phosphatase alcaline (PAL)
- la Biotine
- différents marqueurs fluorescents (FITC, Cyanine, Alexa fluor, Phycoérythrine …)
- l’or colloïdal
- Autres sur demande
