Construction de Plasmides

Nous pouvons prendre en charge la construction ou la modification de vos vecteurs, quel que soit leur application, par un service personnalisé afin de répondre au mieux à vos besoins.

Procédé de clonage de vecteurs

Notre équipe de spécialistes en biologie moléculaire peut définir avec vous la meilleure stratégie de clonage en fonction de votre cahier des charges :

  • Etude in silico
  • Choix et design de la séquence nucléique d’intérêt
  • Optimisation ou non de la séquence
  • Méthode d’obtention de la séquence (PCR, synthèse de gène)
  • Choix du vecteur de clonage (ajout d’étiquette, séquences de promoteur, insertion de séquences de clivage particulières, co-expression ou non …)
  • Choix de la technologie de clonage
  • Clonage selon la stratégie validée
  • Production plasmidique : de quelques µg d’ADN jusqu’à une production large scale
  • Contrôles qualité :
    • Quantification par spectrophotométrie
    • Contrôle du profil de restriction par électrophorèse en gel d’agarose
    • Séquençage (insert complet)

Plasmides pour la production d’anticorps et protéines recombinantes

Construction de vos plasmides d’expression pour la production d’anticorps monoclonaux et de protéines recombinantes.

Nous optimisons les séquences et la conception des vecteurs afin de garantir une expression élevée et une fonctionnalité optimale des protéines produites en E. coli, CHO, HEK ou cell-free.

Plasmides pour la production d’ARNm par transcription in vitro

Construction de vos plasmides d’expression pour la production d’ARNm par transcription in vitro.

Nous fournissons un template de haute qualité (promoteur, UTRs, poly(A) de taille garantie), pour une excellente performance en transcription et traduction.

TEXTE

Plasmides pour la production de vecteurs viraux et thérapie génique

Biologie moléculaire pour le design de vos plasmides pour l’expression de vecteurs viraux (AAV, lentivirus…).

De vos plasmides transgène à vos plasmides helper, nous travaillons selon votre cahier des charges ou réalisons des conceptions sur mesure pour vos applications de thérapie génique.

  • Étape Optionnelle : Séquençage de l’anticorps monoclonal, chaînes lourdes et légère (lien Séquençage Anticorps monoclonaux)
  • Étape 1 : Synthèse de gènes des fragments variables VH et VL
  • Étape 2Clonage des fragments dans le vecteur d’expression. 
  • Étape 3 : Expression des anticorps par transfection transitoire
  • Étape 4 : Suivi de production par nos kits FastELISA (lien FastELISA)
  • Étape 5 : Purification par chromatographie 
  • Étape 6 : Contrôles qualité (lien services analytiques) 
  • Contrôle de pureté par électrophorèse en gel SDS-PAGE (conditions réductrices et non réductrices)
  • Dosage des protéines totales par mesure d’absorbance (spectrophotomètre)
  • Autres contrôles possibles (SEC, test LAL, WB, ELISA, Spectrométrie de masse, CE-SDS…) 
  • Étape 7 : Conditionnement et envoi, accompagné du rapport de production

Et pour les délais de réalisation ?

  • 2 à 3 semaines pour la synthèse des fragments variables VH / VL et le sous-clonage dans le vecteur d’expression (Etapes 1 et 2).
  • 3 semaines pour la production, purification et contrôles qualité de l’anticorps (étapes 3 à 6).
  • Vos productions, de la synthèse de gènes aux anticorps purifiés et contrôlés, en 5 à 6 semaines.

Le temps est un enjeu majeur dans votre projet ? Vous devez obtenir vos lots pilotes dans des délais plus courts ?

Nous mettons à votre disposition une offre de production Fast-Track, vous permettant de recevoir vos productions d’anticorps en seulement quatre semaines.

Nous proposons la production d’anticorps recombinants à partir d’une lignée cellulaire stable ou d’un pool de cellules stable, fournis par le donneur d’ordre ou développés par RD-Biotech.

Cette approche, largement utilisée en biotechnologie, permet d’obtenir des anticorps en grande quantité (plusieurs grammes) tout en garantissant une expression constante et reproductible.

Plasmides pour le développement de lignées cellulaires

Service de développement de plasmides pour la génération de vos lignées cellulaires.

Nous vous accompagnons dans le choix des éléments clés (promoteurs, cassettes d’expression, marqueurs de sélection) pour garantir stabilité, expression efficace et performance durable de vos cellules.

reformating-anticorps

Plasmides pour autres applications

Service de clonage pour l’obtention de plasmides personnalisés pour tous vos projets.

Chaque design est modulable, flexible et optimisé pour s’intégrer parfaitement à vos applications, qu’il s’agisse de création de contrôles PCR, d’études de régulation génique…

Séquençage des anticorps issus d’hybridomes

Service d’expression d’anticorps recombinants par transfection transitoire Prestations prises en charge par RD-BIOTECH
Le client fournit Séquençage Séquences nucléiques VH VL Synthèse clonage Vecteurs d’expression Transfection transitoire Livrables
Anticorps monoclaux Anticorps recombinants purifiés et contrôlés (pureté >98% et qualité endfree
Séquences VH VL
Vecteurs d’expression
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