Production d’anticorps recombinants

Chez RD-Biotech, nous sommes experts dans la production d’anticorps recombinants de haute qualité et de très faible teneur en endotoxines. Grâce à notre plateforme d’expression optimisée sur cellules CHO ou HEK, nous pouvons générer, à partir de vos séquences d’intérêts, de quelques mg à plusieurs grammes d’une large gamme de format d’anticorps, avec des délais de livraison pouvant aller jusqu’à quatre semaines avec notre offre de production Fast-Track

Elle repose sur l’introduction d’un vecteur d’expression codant pour les chaînes lourde et légère dans une lignée cellulaire permettant une expression rapide et à court terme des anticorps recombinants, idéale pour le criblage de candidats ou la production en petite à moyenne échelle.

Les avantages des anticorps recombinants

Les anticorps recombinants produits à partir de séquences génétiques définies garantissent reproductibilité et spécificité avec une possibilité de modifications génétiques adaptées à vos applications scientifiques et thérapeutiques avancées.

Les anticorps recombinants présentent des avantages majeurs. Ils sont produits selon un processus animal-free, dans un environnement chimiquement et biologiquement défini, contrairement aux anticorps issus d’hybridomes.

Produits à partir d’une séquence génétique définie, ils garantissent une reproductibilité optimale entre les lots et assurent la pérennité des réactifs scientifiques. La sélection et l’ingénierie moléculaire permettent d’obtenir des anticorps avec une forte affinité et une grande spécificité pour leur cible, réduisant ainsi les problèmes de cross-réactivité.

Les anticorps recombinants peuvent être facilement modifiés génétiquement, permettant de changer d’isotype, d’ajouter des tags ou marqueurs, d’améliorer l’affinité et la stabilité ou encore d’être humanisés pour des applications thérapeutiques.

Une large gamme (ou un large panel) de formats d’anticorps recombinants

Découvrez la diversité de nos formats d’anticorps : Recombinants chimériques, bispécifiques, afucosylés, humanisés, fragmentés ou encore fusionnés à une protéine

La chimérisation d’un anticorps consiste à associer les régions variables d’un anticorps « parental » ou « donneur » avec les régions constantes d’un anticorps « accepteur » provenant d’une espèce différente. La combinaison des domaines variables murins et des domaines constants humains est la plus répandue mais d’autres combinaisons sont également réalisables.

La chimérisation constitue une approche simple et efficace permettant de conserver l’affinité et la spécificité de l’anticorps parental en réduisant le risque d’immunogénicité.

Notre savoir-faire couvre également la production d’anticorps bispécifiques, capables de reconnaître et de se lier simultanément à deux antigènes ou épitopes distincts. Ces molécules sophistiquées représentent des outils de choix en thérapie, permettant des stratégies de ciblage innovantes et plus précises pour le traitement de pathologies.

Nous  proposons un service de production d’anticorps afucosylés, caractérisés par une activité ADCC renforcée. Dépourvus de résidus de fucose au niveau de leur région Fc, ces anticorps présentent une cytotoxicité cellulaire améliorée. Cette optimisation favorise une meilleure réponse immunitaire, améliore l’efficacité thérapeutique et peut contribuer à réduire les effets indésirables.

Les fragments d’anticorps (ScFv, Fab, Fab’2) et les VHH caractérisés par leur petite taille présentent plusieurs intérêts stratégiques, scientifiques et industriels. L’accès à des épitopes inaccessibles, une meilleure pénétration tissulaire, l’élimination des fonctions effectrices immunitaires du Fc et bien plus encore font de ces molécules des outils extrêmement polyvalents. 

  • Expertise multi-isotypes : Purification d’IgG, IgM, IgA, IgY, etc.
  • Livraison prête à l’emploi : Vos anticorps sont équilibrés dans le tampon de votre choix et livrés avec un rapport de purification complet.

Les anticorps humanisés représentent aujourd’hui la majorité des anticorps thérapeutiques approuvés sur le marché.

L’humanisation d’un anticorps parental est réalisée suivant une version modernisée de “CDR-grafting” développée par Winter et al. (« Medical Research Council » – Cambridge – UK). Cette approche consiste à insérer les régions CDR (Complementary Determining Regions) d’un anticorps parental, généralement murin, dans une structure d’anticorps humain. Cette stratégie permet de conserver la spécificité et l’affinité pour l’antigène tout en réduisant l’immunogénicité chez l’homme. 

Après cette étape d’humanisation, une optimisation des séquences peut être proposée avec en option des analyses complémentaires par modélisation moléculaire. Les objectifs étant :

  • d’améliorer la manufacturabilité en réduisant l’hétérogénéité
  • d’augmenter l’affinité et l’activité biologique de l’anticorps (IC50)

RD-Biotech met également son expertise au service du développement et de la production de vos protéines recombinantes , avec la possibilité de les fusionner à un domaine Fc afin d’optimiser leurs performances selon les besoins spécifiques de votre projet.

Production d’Anticorps recombinants

De la synthèse des fragments variables à la production de l’anticorps purifié et contrôlé, nous assurons un processus complet et modulable, avec des délais standard de 5 à 6 semaines.

  • Étape Optionnelle : Séquençage de l’anticorps monoclonal, chaînes lourdes et légère (lien Séquençage Anticorps monoclonaux)
  • Étape 1 : Synthèse de gènes des fragments variables VH et VL
  • Étape 2Clonage des fragments dans le vecteur d’expression. 
  • Étape 3 : Expression des anticorps par transfection transitoire
  • Étape 4 : Suivi de production par nos kits FastELISA (lien FastELISA)
  • Étape 5 : Purification par chromatographie 
  • Étape 6 : Contrôles qualité (lien services analytiques) 
  • Contrôle de pureté par électrophorèse en gel SDS-PAGE (conditions réductrices et non réductrices)
  • Dosage des protéines totales par mesure d’absorbance (spectrophotomètre)
  • Autres contrôles possibles (SEC, test LAL, WB, ELISA, Spectrométrie de masse, CE-SDS…) 
  • Étape 7 : Conditionnement et envoi, accompagné du rapport de production

Et pour les délais de réalisation ?

  • 2 à 3 semaines pour la synthèse des fragments variables VH / VL et le sous-clonage dans le vecteur d’expression (Etapes 1 et 2).
  • 3 semaines pour la production, purification et contrôles qualité de l’anticorps (étapes 3 à 6).
  • Vos productions, de la synthèse de gènes aux anticorps purifiés et contrôlés, en 5 à 6 semaines.

Le temps est un enjeu majeur dans votre projet ? Vous devez obtenir vos lots pilotes dans des délais plus courts ?

Nous mettons à votre disposition une offre de production Fast-Track, vous permettant de recevoir vos productions d’anticorps en seulement quatre semaines.

Nous proposons la production d’anticorps recombinants à partir d’une lignée cellulaire stable ou d’un pool de cellules stable, fournis par le donneur d’ordre ou développés par RD-Biotech.

Cette approche, largement utilisée en biotechnologie, permet d’obtenir des anticorps en grande quantité (plusieurs grammes) tout en garantissant une expression constante et reproductible.

Reformatting des anticorps recombinants

Le reformatage des anticorps recombinants est un processus clé en biotechnologie et en recherche thérapeutique qui consiste à modifier la structure ou le format d’un anticorps pour l’adapter à des besoins spécifiques.

Processus clé en biotechnologie et en recherche thérapeutique qui consiste à modifier la structure ou le format d’un anticorps pour l’adapter à vos besoins.

RD-Biotech propose un service complet de reformatage de vos anticorps dans un large panel de formats : scFv, diabody, Fab, bispécifiques, humanisation, changement d’isotypes ou de sous isotypes…

reformating-anticorps

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